凝膠滲透色譜分析法或尺寸排除色譜法(GPC/SEC)是高分子、大分子和蛋白質常用的主要分析手段,其中最主要的原因是它能對分子量和分子量分布數據進行定量表征。人們通常將上述分析方法分為兩步。第一步:利用含有適當特性微孔填充材料的色譜柱對溶解樣品按照分子大小/體積進行分離;第二步:利用適當的檢測儀器對被分離的樣品進行分析。
目前市面上有很多可用于GPC/SEC的檢測儀。由于分析具有兩階段的特性,因此在選擇合適的系統(tǒng)時有很多問題需要考慮。對檢測器的選擇進行優(yōu)化是一種既直接又高效的方法,具有較多優(yōu)勢,比如可以僅通過一次實驗就獲得能確定分子量、流體力學尺寸和分子結構的表征。
LALS檢測儀以非常接近入射光線的角度進行測量,從而無需另行外推計算。MALS檢測儀則進行多個角度的測量,并利用測量結果外推得到0o時的散射光強度。
動態(tài)光散射技術(DLS)進一步豐富了光散射檢測儀的選擇范圍,它是一種廣泛應用的測定納米級粒徑范圍的粒度測量手段,對某些GPC/SEC用戶非常有效。該技術的主要應用領域是蛋白質分析,它可以對流體力學分子半徑進行精確測量。DLS檢測儀同時還能進行靜態(tài)光散射測量,由此開啟了進行分子量測量的可能。