凝膠滲透色譜[GPC(GelPermeationChromatography)][也稱作體積排斥色譜(SizeExclusionChromatography)]是三十年前才發(fā)展起來的一種新型液相色譜,是色譜中較新的分離技術(shù)之一。利用多孔性物質(zhì)按分子體積大小進(jìn)行分離,在六十年前就已有報道。McBain用人造沸石成功地分離了氣體和低分子量的有機(jī)化合物,1953年Wheaton和Bauman用離子交換樹脂按分子量大小分離了苷、多元醇和其它非離子物質(zhì)。1959年P(guān)orath和Flodin用交聯(lián)的縮聚葡糖制成凝膠來分離水溶液中不同分子量的樣品。而對于有機(jī)溶劑體系的凝膠滲透色譜來說,首先需要解決的是制備出適用于有機(jī)溶劑的凝膠。二十世紀(jì)60年代J.C.Moore在總結(jié)了前人經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,結(jié)合大網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)離子交換樹脂制備的經(jīng)驗(yàn),將高交聯(lián)度聚苯乙烯凝膠用作柱填料,同時配以連續(xù)式高靈敏度的示差折光儀,制成了快速且自動化的高聚物分子量及分子量分布的測定儀,從而創(chuàng)立了液相色譜中的凝膠滲透色譜技術(shù)。
凝膠滲透色譜分離過程是在裝有多孔固定相的色譜柱中進(jìn)行的。當(dāng)尺寸大小不同的分子通過色譜柱時,可占據(jù)的窨體積也不同。對流動相分子而言,填料孔的尺寸大得多,因些,流動相可以自由擴(kuò)散出入;而大小不同的樣品分子則要滲透到不同的孔中,較大的分子只能進(jìn)入較大的孔中,較小的分子不僅能進(jìn)入大孔、中孔,還能進(jìn)入較小的孔。因此,較小分子在柱內(nèi)流經(jīng)的路程和時間比大分子長得多,這樣,當(dāng)不同尺寸的高聚物分子流經(jīng)多孔色譜柱時,大分子先被淋出,而小分子后淋出,因而高聚物分子便按照尺寸大小分開了,用檢測器對其分別進(jìn)行測量就可以獲得樣品的組分信息。
凝膠滲透色譜有兩個主要用途——表征聚合物和將混合物分離成獨(dú)立的組分,例如聚合物、低聚物、單體以及任何非聚合體的添加劑。凝膠滲透色譜是目前僅有的能表征聚合物分子量分布(所有合成聚合物都具有的性質(zhì))的技術(shù)。此外,聚合物混合物也可以被分離成獨(dú)立的組分,例如聚合物和塑化劑。天然存在的聚合物(例如木質(zhì)素、蛋白質(zhì)和多糖)也常用極性有機(jī)相或水相凝膠滲透色譜進(jìn)行研究。凝膠滲透色譜對低聚物和小分子的分離也非常出色。